血乳酸测定的改良探讨

（宁德师范学院化学与材料学院，福建 宁德  352100）

摘 要：在一定量运动后血乳酸（Bla）水平分析已成为监控和调整训练时的一种普遍手段。杨氏“血液乳酸超微量改良法”迄今为止比较广泛运用，由于此方法操作过程中有较多程序，有时在一些程序上可能产生误差而对测定结果有影响。本文对取样操作中的取样部位的运动强度和污染程度、血液的处理和保存、显色液的存放、样品的分析和标定等一些实际应用问题进行讨论分析。

关键词：血乳酸；测定方法；误差分析

基金项目：2020年宁德师范学院大学生创新创业训练计划项目《血乳酸浓度测定改进方法》（项目编号X20201039809）（基金项目结题要用，请保留不要删除）

第一作者简介：施容（2000-），宁德师范学院化学与材料学院化学专业在校本科生。

*通讯作者：谢金宇(1979-)，宁德师范学院副教授。

引言

测定血液乳酸是运动员在运动前可借鉴运动水平的一项重要指标，因为血乳酸浓度与运动强度等有相关联系。目前血液乳酸测定多采用化学法和酶法[1]，也有的采用YSI血乳酸分析仪测试法[2]，根据实验要求，我们在杨天乐[3]等人的超微量法的基础上,考虑到该方法操作步骤较多，有时在某些环节上可能产生误差而影响结果[4]，根据研究工作的实际需要对此方法进行了改进。为了使测定更具有效性和可靠性，避免科研结果所反映的任何阳性反应都可能是一种偶然性而开展此次研究。对实际测定过程中可能会出现的5个方面展开探究。

1 实验部分

1.1 原理部分

乳酸在Cu2+的催化下，与浓H2SO4作用生成C2H4O，C2H4O再与对羟基联苯作用，生成紫红色物质，即可进行比色测定。

1.2 主要药品与实验用品

1.2.1 试剂 10%三氯醋酸溶液(C.P)；4%硫酸铜溶液(C.P)；浓硫酸：比重1.84(G.R)；1.5%对羟基联苯溶液；乳酸标准储存液：(1ml含1 mg)；乳酸标准应用液： (1ml含0.01mg)；

1.2.2 仪器 分光光度计一台；试管；血色素吸管；离心机；移液管；水浴锅

1.3 操作过程

图1 测定操作流程图

表1测定所用试剂

1.4　实验误差探究及分析

1.4.1 取样部位

从理论上讲，有3个取样部位：即动脉、静脉和毛细血管。但一般不采用动脉取样，有一定危险性。故一般的取样部位是是耳垂或指尖的毛细血管。应注意2个问题：

（1）部位参与运动的程度

在运动中取样部位属于不活动一类的耳垂，它的毛细血管开放数量较少，血流缓慢[5]，测得的血乳酸值偏低，甚至与安静状态下的值没有差异。所以取样位置尽量定在与运动相关较高的部位。若采样人员采样于运动员该部位，需当采用热敷、揉挤等手段促进耳垂取样部位的血液循环。

表1耳垂指尖血乳酸值对比 （单位：mmol/L）

（2）污染情况

污染主要是因出汗引起的。本次实验证明汗乳酸水平远远高于血乳酸水平，所以血样中混入微量的汗液将导致测定值的偏高[6]。实验探究采用溶有碳酸氢钠的水来洗手，再把手擦干，然后进行测定血乳酸。因为手上的汗液里的乳酸可以与碳酸氢钠反应而中和掉。

表2碳酸氢钠处理与否的血乳酸值对比 （单位：mmol/L）

1.4.2 血液的处理和保存

乳酸的易变性和红细胞内乳酸的持续生成要求快速有效地处理祥品。在测定过程中，往样品管中加入三氯醋酸以防止糖元酵解会引发稀释误差[7]。在自动分析时加入等量的该种溶液于缓冲液中，以消除稀释误差。

表3三氯醋酸加入与否血乳酸值对比 （单位：mmol/L）

1.4.3显色液的存放

血液乳酸的显色液，放置不同的时间是否影响实验结果，产生误差[8]。结果表明，反应产物的颜色十分稳定，显色液在40min内比色结果不受影响血乳酸值的测定。

表4血乳酸显色液存放时间对比 

1.4.4　样品的分析与标定

精确的参考点是测定的基础。故在血乳酸测定中用已知乳酸水平的标准样测定管来校正测定系统[9]。实验探究校正值应尽量接近预计的血乳酸水平。

2 结果与讨论

大量的运动实践证明乳酸水平与运动强度相关。分析血乳酸变化曲线时应明确血乳酸值受诸多因素的影响。除上述实验中可能会产生影响的各种因素外，受试者的饮食、环境、温度和机能状况等均可能影响血乳酸水平，分析时应该综合进行分析。

3 小结

根据以上进行总结，在操作中应注意以下几方面的问题可保证结果更具有效性:
①完善取样技术，做到取样部位合理化以及避免污染、时间统化；②血样处理过程标准化，尽量减少实验误差；③实验过程条件要标准化，例如比色皿选定以及显色液存放时间；④分析讨论时注意考虑各种影响因素，特别是个体的差异；⑤应用自动分析仪法，应经常进行近实验值的校正、以减少系统误差。
  

参考文献

[1] 崔云龙,王海燕. 乳酸氧化酶法测定血浆中乳酸 [J]. 中华医学检验杂志,1997, 20:288.

[2] 张鹏. 血浆乳酸测定方法的建立[J]. 实用医技杂志,2005(19):2831.

[3] 杨天乐,秦孝梅. 血液乳酸测定的超微量改良法[J]. 体育科学,1983(01):47-50.

[4] 王忠山. 关于血乳酸超微量测定方法的探讨[J]. 天津体育学院学报,1987(00):72-74.

[5] 金花. 恢复期血乳酸测定方法的一些实际问题（综述）[J]. 山东体育学院学报,1995(02):10-13.

[6] 吕毓虎,蒲西安,程林. 不同运动强度对人体血乳酸的影响[J]. 四川体育科学,2014,33(04):33-35.

[7] 窦兰君,李文选,汪济民. 血液乳酸超微量改良法的改进及其应用[J]. 解放军预防医学杂志,1994(02):118-122.

[8] 覃纲,李嘉燕,韦柳青,姜福富,符兆胤,罗柳青. 血标本放置时间及温度对危重病患者血乳酸值的影响[J]. 临床和实验医学杂志,2012,11(02):111+114.

[9] 孟泽,李玲. 适用于各种标本的快速,准确的乳酸测定方法[J]. 临床检验杂志,1987,5:2. 

　　来源：化学工程与装备 - 官方网站 - 创刊于1972   2022年第12期   在线投稿  >>